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蝴蝶兰的组织培养与快速繁殖

信息来源:c-yl.com  时间:2014-05-27  浏览次数:563

    蝴蝶兰属热带气生兰,花形似蝴蝶,因而得名。其花形态美丽,色彩丰富,花期长,在热带兰中有“兰花皇后”之美称,是近年来最受欢迎的洋兰之一。蝴蝶兰是单茎性气生兰,植株极少发育侧芽,且种子极难萌发,对其进行常规性的繁殖,增殖速度很慢,因此,多采用组织培养的方法对其进行快速繁殖,以达到工厂化育苗的目的。
  1 植物材料 蝴蝶兰Lm品种的幼叶。

  2 培养条件 诱导培养基:MS+BA3.0+NAA0.2。继代培养基:MS+BA2.0+NAA0.5。在上述培养基中均加入蔗糖20g/L(克/升),琼脂12g/L(克/升),椰汁200mL/L(毫升/升)。育苗培养基:1/2MS+IBA1.5+NAA0.05,并加入蔗糖20g/L(克/升),琼脂12g/L(克/升),活性炭5g/L(克/升),椰汁200mL/L(毫升/升)。培养温度25℃-28℃,每日光照10h-12h(小时),光照强度1600lx-2000lx(勒克斯)。

  3 培养方法与生长分化情况

  3.1 外植体接种 从蝴蝶兰植株上取下幼叶(以3-4月龄的植株最好),放在自来水下冲洗干净,然后放入烧杯内待用。在超净工作台上,将烧杯内的叶片用75%酒精消毒30s(秒),然后用无菌水清洗2-3遍,再用0.1%升汞溶液浸泡11min(分钟),最后用无菌水冲洗4-5遍。用无菌手术刀将叶片切成5mmx5mm见方的小块,平放或按极性接种在诱导培养基上,近轴面向上,每瓶不宜接种太多。

  3.2 原球茎的诱导与增殖 幼叶切块在诱导培养基上培养1-2月后,从每个叶片组织块上产生1-7个不等的原球茎,此时,在无菌条件下,将原球茎取出切割成几小块,转入继代培养基中,进行增殖培养。培养一段时间(60天左右)后,再进行分割转移,通过这种方式,原球茎可成倍增长。

  3.3 小植株的培养 将不需继代的原球茎转移到育苗培养基上分化出芽,并逐渐发育成丛生小植株。在无菌条件下,切开丛生小植株,将小植株转入育苗培养基上培养。不久,小植株生根,当小植株长到一定大小时,移入温室。切离丛生小植株时,基部未分化的原球茎及刚分化的小芽应接入诱导培养基中,作为种苗。一段时间后,将长大的种苗移出,种植,小苗及原球茎可继续增殖与分化。

  3.4 移栽及管理 当小植株长至4cm左右,叶3-4片,根2-3条时,即可移栽。将小植株带瓶移入温室2周左右,然后打开瓶塞炼苗3-5d(天),取出苗后,用水冲洗掉植株根部的培养基,将根部放于70%甲基托布津溶液中消毒4h(小时),药液浓度为1500倍。将苗吸干水分后阴晾1h(小时),然后定植于水苔育苗盘中。刚定植的植株应遮光50%左右 ,温度控制在18℃-28℃,湿度以80%-90%为宜,以后逐渐保持在70%左右。缓苗后(两周左右)逐步提高光照强度至6000lx-8000lx(勒克斯)。蝴蝶兰根部忌积水 ,喜通风和干燥,水分过多,易引起根系腐烂。刚出瓶的小苗应勤补水,中苗或大苗根据干湿程度浇水,一般7d(天)-10d(天)左右,基质变干,盆面发白时,宜浇水,浇水时要让整个植料湿透。

  4 小结 在蝴蝶兰的组织培养过程中,叶龄与成功率密切相关,取叶的实生苗年龄以3-4月为最好,其诱导率及每个外植体上的原球茎个数最高。叶切段大小与诱导率直接相关,切段太小,存活率低,以0.5cm左右为最好。此外,出苗时间应掌握在春季为好,且在移栽初期的适时遮阴极其重要,培养条件温度不宜超过28℃。

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